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147 人阅读发布时间:2025-06-06 13:35
细胞外囊泡(EVs)是细胞衍生的膜状纳米颗粒,负责在细胞间传递蛋白、核酸和脂质等生物活性物质,这使得它作为药物呈递载体在细胞治疗领域呈现出巨大的潜力。另外,由于EVs在体液(如血液、尿液、母乳等)中含量丰富且稳定,其也被认为是极有前景的疾病诊断标志物。随着对EVs的关注日益增加,急需高效的分析和表征技术。
Corning Videodrop提供了一种基于干涉光学显微镜(ILM)的新方法,只需少量样本(5-10μL),即可快速表征纳米颗粒。本文比较了Videodrop与传统的可调谐电阻脉冲感应(TRPS)方法在EVs表征方面的有效性。
实验结果
EVs浓度检测
使用SEC法从6个血浆样本和4个尿液样本分离EV,分别由Videodrop(ILM法)和qNano(TRPS法)进行定量分析。结果显示Videodrop和qNano的结果存在极高的线性相关性(R2=0.9553)(图1)。

图1. Videodrop和qNano对从生物体液(血浆n=6和尿液n=4)中提取的EV进行定量比较。
EVs的尺寸分布
Videodrop通过计算每个纳米颗粒的轨迹获得其尺寸信息。图2A展示了Videodrop测量的血浆和尿液中EVs的分布,图2B展示了EVs尺寸的平均值,显示了血浆和尿液中EVs大小存在差异。

图2. 通过Videodrop比较血浆和尿液样本中EVs的大小
储存条件对EVs的影响
Videodrop可用于检测不同储存条件对于EVs的影响。
EVs在不同温度(4℃、-20℃、-80℃)储存3周,然后用Videodrop对EVs弄对进行定量检测,结果显示,4℃与-80℃条件下长期储存的EVs损失小于20%,而-20℃存储两周的EVs损失已经严重至无法检出(图3)。

图3. EVs在4℃、-20℃、-80℃长期储存后稳定性检测。
结论
Videodrop与qNano技术的比较研究表明,Videodrop能够快速、准确地表征EVs的浓度和大小。该方法适用于基础研究、转化研究及临床试验,具有广泛的应用前景。
参考文献
Application Note: Corning® Videodrop for a Fast Characterization of Extracellular Vesicles Following a Standard Protocol (CLS-AN-755)