Corning Matrigel基质常见问题

A: Corning Matrigel基质是一种蛋白混合物，经过透析处理后溶解在DMEM和庆大霉素中。蛋白质成分会发出荧光，但其激发光谱在紫外线范围内。DMEM中含有维生素等物质，可能会对实验造成干扰。我们建议进行对照实验，以便确定背景荧光。

A: 由于二氧化碳与碳酸氢盐缓冲液和酚红的相互作用，冷冻或解冻后的

A: 产品应置于冰上，在2°C至8°C冰箱 (靠后的位置) 或冷藏室中过夜解冻。

A: 需要。一旦超过10°C，Corning Matrigel基质即开始凝胶，因此我们建议在操作过程中使用预冷的移液管、吸头和离心管。

A: 可以。Corning Matrigel基质可以置于-70°C保存，但超低温和玻璃瓶存在安全隐患。可将Matrigel基质分装，保存在聚丙烯或其他可耐受-70°C低温的小管中。

A: 对于涉及颜色检测的实验，建议使用无酚红Corning Matrigel基质。例如，与荧光染料或Drabkin's试剂结合使用，对内皮细胞成管进行定量分析。对于子宫内膜细胞培养，也必须使用无酚红培养基。此外，酚红还有类雌激素效应。酚红与某些非甾体雌激素的结构类似，具有显著的雌激素活性。酚红还是一种潜在的内分泌干扰化合物，可能会干扰实验动物体内激素的自然产生和代谢。

A: Corning Matrigel基质包被过的培养板最好当天使用，具体取决于实验目的。使用无血清培养基时，包被后的培养板可在37°C培养箱中存放至多一周。使用Matrigel包被溶液时，hESC专用Corning Matrigel基质包被过的培养板可在4°C下存放至多一周。

A: 可以使用预冷的无血清培养基或pH 7.4的磷酸盐缓冲液 (PBS) 稀释Corning Matrigel基质。

A: 请使用外置活塞式移液器或注射器进行移液，以确保准确性。Corning Matrigel基质会粘附在温热的移液器或注射器内外表面，因此强烈建议使用预冷的移液器或注射器。

• 分液：吸液时不要触及瓶子底部。切勿“吹出”移液器或吸头的液体。

• 移液器：需要分液5mL时，应吸取6mL，分液结束时移液器内留有1mL。

• 外置活塞式移液器：按压到第二档位吸液，然后按压到第一档位进行分液。

A: Corning Matrigel基质是从EHS小鼠肿瘤中提取的重组基底膜。新鲜提取的原料中包含层粘连蛋白、IV型胶原、巢蛋白、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖以及EHS肿瘤中含有的生长因子。这些蛋白具有多个功能域，能够与层粘连蛋白、IV型胶原和肝素结合蛋白相互作用，构成Matrigel基质的基本结构。在22°C至37°C的温度条件下，有足够的能量促使共价键结合，使Matrigel基质形成凝胶。而在4°C下，由于没有足够的能量促使共价键结合，Matrigel基质呈现液化或液体状态。

A: 若Corning® Matrigel®基质被稀释到过低的浓度 (如低于3mg/mL)，形成的凝胶较弱或易碎，更容易从塑料组织培养器皿表面分离。应优化细胞接种密度，高接种密度可能会影响成胶。

A: 我们建议尽可能减少冻融次数。应在第一次解冻后进行分装，然后置于-20°C或-70°C冰箱保存。